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细胞复苏状态不佳,如何通过尊龙凯时调整优化

发布时间:2025-02-15   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时在细胞复苏过程中,若细胞状态不佳,需进行及时调整。细胞复苏后状态差的根本原因及相应解决办法如下:

细胞复苏状态不佳,如何通过尊龙凯时调整优化

1. 细胞冻存不当

解决方案:调整细胞状态,增加血清的比例,之后持续进行传代调整,以改善细胞状态。

2. 自行制备的冻存细胞无活性

解决方案:在制备冻存细胞时,使用传代次数较少且处于对数生长期的细胞;提高冻存密度可以提升复苏存活率,推荐的细胞密度为100~300万细胞/mL。

3. 细胞复苏方法不当

解决方案:复苏时应贯彻“快融”原则,尽量快速融化,以降低细胞损伤。为保证冷冻细胞迅速解冻,接种前应使用预热的生长培养基慢慢稀释细胞。

4. 复苏培养基使用不当

解决方案:确保使用前的培养基已预热,并尽快移除含有冷冻保护剂的培养基,以避免细胞活力下降。

5. 对细胞的处理不够轻柔

解决方案:在冻存和复苏过程中,避免对细胞造成机械损伤。请勿使用涡旋振荡或用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(除非是在培养昆虫细胞时),也应避免高速离心细胞。

6. 细胞稀释过度

解决方案:将解冻后的细胞以高密度接种,以改善复苏效果。

7. 冻存液中保护剂未避光储存

解决方案:若冻存保护剂未避光储存,可能转变为对细胞有毒的物质;建议新取一瓶冻存保护剂,并重新冻存细胞。

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